Validation d’une méthode ELISA pour la détection des entérotoxines SEA et SEB dans les matrices alimentaires et étude des effets de matrice sur leur production et leur st

L'Agence nationale de sécurité sanitaire de l'alimentation, de l'environnement et du travail (Anses) assure des missions de veille, d'expertise, de recherche et de référence sur un large champ couvrant la santé humaine, la santé et le bien-être animal, et la santé végétale. Elle offre une lecture transversale des questions sanitaires et appréhende ainsi, de manière globale, les expositions auxquelles l'Homme peut être soumis à travers ses modes de vie et de consommation ou les caractéristiques de son environnement, y compris professionnel.

L’Anses informe les autorités compétentes, répond à leurs demandes d'expertise. L'Agence exerce ses missions en étroite relation avec ses homologues européens.

Les intoxications alimentaires collectives (TIAC) d’origine staphylococcique résultent de l’ingestion d’entérotoxines thermostables produites par les staphylocoques à coagulase positive (SCP). En France comme en Europe, les produits laitiers et carnés constituent les matrices le plus fréquemment associées aux TIAC déclarées. Dans ce contexte, la détection directe des entérotoxines dans les denrées alimentaires représente un enjeu majeur, tant pour les investigations lors d’épisodes de TIAC que dans le cadre des contrôles officiels.

Les méthodes immuno-enzymatiques de type ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) sont aujourd’hui largement utilisées, car elles répondent aux exigences normatives en matière de détection des entérotoxines dans des matrices alimentaires complexes. Toutefois, leurs performances analytiques peuvent être affectées par des effets de matrice, notamment dans les produits laitiers et carnés riches en graisses, protéines et autres composés susceptibles d’interférer avec la détection. Par ailleurs, l’émergence des aliments à base de protéines végétales introduit un niveau supplémentaire de complexité analytique. À ce jour, ces matrices végétales émergentes n’ont pas fait l’objet d’études spécifiques concernant la détection des entérotoxines staphylococciques.

Dans le cadre d’un projet collaboratif entre l’équipe Staphylocoques de l’Anses et le laboratoire LERI du CEA, une méthode ELISA dédiée à la détection des entérotoxines de types A et B (SEA et SEB) a été développée. Les travaux de ce stage visent à :

(i) vérifier l’hypothèse selon laquelle cette méthode permet une détection fiable des entérotoxines SEA et SEB dans les matrices laitières et carnées, tout en évaluant ses performances analytiques (sensibilité, spécificité, répétabilité et reproductibilité) conformément aux exigences des laboratoires de référence et en tenant compte des effets de matrice ;

(ii) explorer, dans un second volet, le développement des staphylocoques à coagulase positive et leur capacité à produire des entérotoxines dans des matrices végétales émergentes.