Ciblage des CEllules DEndritiques pLAsmacytoïdes dans la prise en charge des Spondyloarthrites : projet CE DE LA SpA

1. Situation du sujet de recherche dans la littérature

La spondyloarthrite (SpA) est un des rhumatismes inflammatoires chroniques les plus fréquents en France métropolitaine avec une prévalence de 0,15% pour la spondyloarthite axiale radiographique (r-axSpA) (ancienne spondylarthrite ankylosante) (1). Ce rhumatisme se caractérise principalement par une atteinte inflammatoire du rachis et des articulations sacro-iliaques (2). Au-delà de l’atteinte axiale, on peut observer une atteinte articulaire périphérique et des atteintes extra-musculo-squelettiques atteignant avec le psoriasis, les uvéites et maladies inflammatoires chroniques de l’intestin (MICI) (3). La voie IL-23/Th17 est essentielle dans l’axSpA et l’IL-17A représente une cytokine centrale dans la physiopathologique de cette maladie (4). Cette cytokine peut être produite par différents types de cellules immunitaires dont le Th17, les mucosal-associated invariant T-cells (MAIT) (5) et les Tissue resident memory T cells (6). Ces cellules sont à cheval entre l’immunité innée et adaptative et d’autre cellules de l’immunité innées pourraient être associées à leur activation comme les polynucléaires neutrophiles ou les macrophages. Néanmoins, d’autre cellules comme les cellules dendritiques plasmacytoïdes (pDC) ont été retrouvées dans les enthèses et pourraient être potentiellement impliquées dans cette activation (7).

Les recommandations de prise en charge de la SpA ont permis de standardiser la prise en charge de nos patients (8). Mais malgré les progrès actuels, un nombre important de patients restent actifs et sont définis comme complexe à prendre en charge (9-10). Dans cette catégorie de patients, on va considérer un sous-groupe de patient réfractaire aux traitements, c’est-à-dire qui présentent toujours des signes objectifs d’inflammation et ce malgré l’utilisation d’au moins 2 biomédicaments de mode d’action différent (9 -11). En oncologie et dans d’autres rhumatisme inflammatoires tels que le lupus erythémateux disséminé, les sclerodermies ou certaines polyarthrite rhumatoïdes, les traitements par thérapie CAR-T (Chimeric Antigen Receptor T cell) ont permis de prendre en charge ces patients réfractaires et très inflammatoires avec des résultats impressionnants (12). La plupart des CAR T-cells testés à ce jour sont dirigés contre le Lymphocyte B via le CD19 (13), mais cette cible ne semble pas la plus pertinente en cas de SpA où l’implication du Lymphocyte B est mineure voire quasi nulle. Néanmoins, le ciblage d’une autre lignée cellulaire par un CAR T-cell représente une option intéressante et parmi ces autres cellules, les pDCs représentent une cible intéressante.

Les pDCs, cellules de l’immunité innée, représentent entre 0.1-0.5% des cellules mononucléées circulantes (14). La particularité de ces cellules est leur très forte capacité de sécrétion d’interféron de type I (IFN-I). Cette cytokine majeure de l’immunité innée est produite via la stimulation des TLR7 et 9, récepteurs cytosoliques des pDCs principalement activés par des fragments d’ARN et d’ADN (15-17). Des preuves de plus en plus nombreuses suggèrent que les pDCs sont impliquées dans le développement de pathologies inflammatoires via la surproduction d’IFN-I (18). De plus, elles possèdent une fonction de présentation d’antigènes mais aussi une fonction de sécrétion de cytokines pro-inflammatoires (IFN-I, IL-6, IL-12, IL-23, CXCL8, CXCL10, CCl3 et CCL4).

Dans certaines pathologies inflammatoires, les pDCs circulantes sont quantitativement plus faibles chez les patients que chez les donneurs sains, mais infiltrent les tissus lésés et inflammatoires. Nous avons évalué le taux de pDC circulant chez deux de nos patients avec une SpA réfractaire et ces taux étaient également inférieurs (0.05%).

Ainsi, les pDCs présentent une forte capacité d’infiltration tissulaire (16,19–24).

De manière intéressante nous avons réalisé une évaluation de l’infiltration synoviale de pDCs dans le modèle SKG, modèle murin de SpA. Il apparait que la proportion de pDCs était franchement augmentée au niveau synovial chez les souris arthritiques, alors même qu’elles étaient quasi absentes dans les ganglions poplités mettant en évidence ce fort pouvoir d’infiltration tissulaire des pDCs. De plus, chez un de nos patients nous avons évalué la quantité de PDC dans le liquide synovial et il y avait 4 fois plus de pDC dans le liquide synovial que dans le sang périphérique renforçant l’hypothèse de l’infiltration des tissus inflammatoires par le pDCs.

Cette thèse sera l’occasion de réaliser 3 grands objectifs :

1. Caractériser la dynamique d’infiltration tissulaire des pDC en cytométrie de flux, au cours du développement de l’arthrite dans un modèle murin de SpA, le modèle SKG  et d’évaluer l’effet de l’inhibition de l’interferon de type I sur les dynamiques cellulaires.

2. Déterminer les interactions fonctionnelles entre pDC et lymphocytes pro-inflammatoires (MAIT/Th17) avec des cocultures de pDC et de MAIT et/ou de Th17.

3. Évaluer une stratégie de déplétion ciblée in vitro de pDC synoviaux par CAR-T cells anti CD123 générés chez des patients réfractaires aux traitements ciblés identifiés via la cohorte locale, la cohorte MISTIC.

Université Marie et Louis Pasteur

Laboratoire d'accueil : RIGHT

 connaissances et compétences requises

Diplômé en master Immunologie de préférénce

Expérience en Immunologie et Biologie Cellulaire

Compétences, appétences pour les analyses bioinformatiques / Biostatistiques

Réalisation d’expérimentation animale => formation souhaitée mais possibilité de la réaliser au début de la thèse